ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA TERPENOID YANG AKTIF ANTIBAKTERI PADA HERBA MENIRAN (Phyllanthus niruri Linn)

Telah dilakukan isolasi dan identifikasi senyawa terpenoid antibakteri dari herba meniran (Pyllanthus niruri Linn) dengan metode Kromatografi Gas – Spektroskopi Massa. Ekstraksi senyawa dilakukan dengan dua cara yaitu

maserasi dengan pelarut metanol dan sokletasi dengan pelarut n–heksanaa.

Hasil uji fitokimia menggunakan pereaksi Lieberman-Burchard pada ekstrak n–heksanaa hasil maserasi dan ekstrak n–heksanaa hasil sokletasi menunjukkan bahwa kedua ekstrak tersebut positif mengandung senyawa

terpenoid. Hasil uji aktivitas ekstrak n–heksanaa terhadap bakteri Escherichia coli ATCC® 25292 dan

Staphylococcus aureus ATCC® 25293 menunjukkan fraksi n–heksanaa hasil sokletasi memberikan daya hambat yang

lebih baik. Daya hambat fraksi n–heksanaa hasil maserasi adalah 1 mm terhadap bakteri Escherichia coli dan 0,5 mm

terhadap bakteri Staphylococcus aureus, sedangkan daya hambat fraksi n–heksanaa hasil sokletasi yaitu 10 mm

terhadap bakteri Escherichia coli dan 12 mm terhadap bakteri Staphylococcus aureus.

Ekstrak n–heksanaa hasil sokletasi dimurnikan dengan menggunakan kromatografi kolom dan diidentifikasi

dengan Kromatografi Gas – Spektroskopi Massa. Data Kromatografi Gas – Spektroskopi Massa, menunjukkan kemungkinan ekstrak n–heksanaa hasil sokletasi mengandung dua buah senyawa yaitu phytadiene [M+] 278 dan senyawa 1,2-seco-cladiellan m/z 335 [M+- H].

Perkembangan penggunaan obat-obatan tradisional khususnya dari tumbuh-tumbuhan untuk membantu meningkatkan derajat kesehatan masyarakat sudah cukup meluas. Salah satu jenis tumbuhan yang dapat digunakan sebagai obat adalah meniran (Osward, 1995). Meniran adalah herba yang berasal dari genus Phyllanthus dengan nama ilmiah Phylanthus niruri Linn (Heyne, 1987). Herba ini secara

tradisional dapat digunakan sebagai obat radang ginjal, radang selaput lendir mata, virus hepatitis, peluruh dahak, peluruh haid, ayan, nyeri gigi, sakit kuning, sariawan, antibakteri, kanker, dan infeksi saluran kencing (Anonim, 2005; Mangan, 2003).

Herba meniran mengandung metabolit sekunder plavonoid, terpenoid, alkaloid dan steroid (Kardinan dan Kusuma, 2004). Beberapa hasil penelitian menunjukkan senyawa terpenoid memiliki aktivitas sebagai antibakteri yaitu monoterpenoid linalool, diterpenoid (-) hardwicklic acid, phytol, triterpenoid saponin dan triterpenoid glikosida (Grayson, 2000; Bigham et al., 2003; Lim et al., 2006; Anonim, 2007; Anonim, 2007) 

Masalahnya : apakah herba meniran (Phyllanthus niruri Linn) mengandung senyawa terpenoid antibakteri????

MID SEMESTER KIMIA BAHAN ALAM

SOAL DAN JAWABAN MID SEMESTER KIMIA BAHAN ALAM

NAMA: waldi afrianto                                                            
NIM: RRA1C109027
DOSEN: Dr.Syamsurizal

soal
 

1. jelaskan hubungan struktur dan kereaktifan beberapa senyawa yang anda kenal terhadap suatu penyakit tertentu?
2. uraikanlah dan berikan contoh dimana letak peran penting suatu metabolit sekunder dalam suatu tumbuh-tumbuhan?
3. kemukakan gagasan anda,bagaimana idenya suatu senyawa bisa diisolasi dan purifikasi?
4.kemukakan  bagaimana idenya suatu senyawa bahan alam dapat diketahui alur biosintesisnya?
 

 

jawaban:    

1. Senyawa aktif vinblastin dan vinkristin berkhasiat antikanker pada  leukemia,ehrlich ascitic liver carsinoma dan walker carcinoma. Jugamenghentikan pembelahan sel (mitos) kanker pada tingkat metafase dan menghambat sintetis purin, DNA dan RNA. Vimblastin terutama untuk penyakit hodgki"s dan chorioepithelioma, juga efektif pada kanker payudara, indung telur (ovarium), testis dan nephroblastoma. Vinkristin lebih efektif pada leukemia granulostik dan limfositik akut, terutama pada leukemia limfositik dan mielositik akut pada anak-anak.

Mekanisme kerjanya dengan mengikat tubuli dan menghambat pembentukan komponen mikrotubuli pada kumparan mitosis sehingga metafase berhenti.Vinkristin memiliki aktivitas lebih besar dibandingkan vinblastin karena memiliki kemampuan penetrasi ke dalam sel kanker yang lebih

 

Struktur vincristin CHO

2. Penemuan berbagai senyawa obat baru dari bahan alam semakin memperjelas peran penting metabolit sekunder tanaman sebagai sumber bahan baku obat. Metabolit sekunder adalah senyawa hasil biogenesis dari metabolit primer. Umumnya dihasilkan oleh tumbuhan tingkat tinggi, yang bukan merupakan senyawa penentu kelangsungan hidup secara langsung, tetapi lebih sebagai hasil mekanisme pertahanan diri organisme
contohnya :Flavonoid

Flavonoid merupakan komponen tumbuhan zat anti oksidan sebagai suplemen sel, yang memiliki sifat sebagai bahan-bahan antijamur, antibakteri, antivirus, antioksidan dan anti-inflamasi. Menurut penelitian, kandungan flavonoid pada satu tetes propolis setara dengan flavonoid yang dihasilkan dari 500 buah jeruk. Kandungan flavonoid dalam propolis memiliki kekuatan antioksidan dan sudah terbukti dapat melawan radikal bebas serta melindungi lemak dan komponen-komponen lain seperti vitamin C dari kerusakan dan proses oksidasi. Dan kemungkinan yang lain Propolis memberikan efek sebagai anti penuaan dan mencegah kerusakan sel.

3.  Untuk mengisolasi kofein dari teh hitam , mula – mula 25 mg serbuk teh hitam ditempatkan dalam soxhlet extractor kemudian dilakukan ekstraksi dengan menggunakan pelarut etanol selama tiga jam . Prinsip dari ektraksi adalah menarik suatu senyawa tertentu kedalam pelarut yang sesuai

Ekstrak yang diperoleh kemudian diletakkan dalam cawan porselein yang telah berisi 12,5 magnesium oksida dalam 75 ml air , kemudian diuapkan hingga kering dengan penangas air . Penambahan magnesium oksida dilakukan dengan tujuan untuk menjerap kofein dalam ekstrak dan untuk menghilangkan senyawa tannin

Langkah berikutnya adalah mengekstraksi dengan menggunakan 7,5 ml kloroform sebanyak tiga kali dalam corong pisah . Digunakannya kloroform karena kofein mudah larut dalam kloroform

Untuk mendeteksi kebenaran kofein yang didapat dilakukan murexide test dan uji spektrum kofein . Murexide test dilakukan dengan cara melarutkan cuplikan tersebut dalam tiga tetes HNO₃  pekat kemudian diuapkan sampai kering dan ditambahkan dua tetes NH₄OH , hasil dikatakan positif jika berwarna merah lembayung   ( harborne , 1996 ) . Hal tersebut tidak dilakukan karena tidak tersedianya NH₄OH di laboratorium

Pada praktikum ini untuk mendeteksi keberadaan kafein digunakan uji kromatografi lapis tipis ( KLT)  Keuntungan dari sistem KLT antara lain : dengan jumlah zat yang sangat kecil dapat dipisahkan dengan jelas , hasil pemisahan lebih baik dengan batas deteksi lebih rendah , butuh waktu singkat dengan sedikit alat

Pada praktikum ini juga dilakukan KLT preparatif pada ekstrak air, Didapatkan 2 bercak dengan garis memanjang. Bercak tersebut lalu dikerok dan dilarutkan dalam kloroform, lalu ditotolkan pada lempeng KLT silika gel GF 254 dan fase gerak kloroform-etanol

4. Cara untuk mengetahui jalur biosintesis pada suatu senyawa adalah :
 1. Dengan mengananalisis suatu senyawa kompleks sehingga kita dapat   mengetahui       building block penyusunnya yang dapat mengarahkan kita kepada senyawa asal dan jalur biosintesisnya.
2. Pelabelan dengan radioisotop

 Proses pelabelan dengan menggunakan ³²P dari ATP terlabel radioaktif dilakukan dengan menghilangkan 5’ fosfat dari oligonukleotida menggunakan enzim alkalin fosfatase dan menggantikannya dengan fosfat terlabel radioaktif menggunakan polinukleotida nuklease

ISOLASI ALKALOID DARI FRAKSI AKTIF EKSTRAK BUAH MELUR (Brucea javanica (L) Merr) SEBAGAI ANTIBAKTERI

 Indonesia merupakan negara yang terletak disalah satu kawasan tropis yang kaya akan
keaneka ragaman jenis tumbuhan. Berbagai tumbuhan ini bisa dimanfaatkan sebagai sumber
ramuan obat tradisional. Selain itu juga bisa sebagai sumber bahan kimia alami yang
potensial untuk dikembangkan menjadi zat warna, kosmetik, bahan baku industri dan bahan
aktif pestisida. Kandungan senyawa kimia dari tumbuhan yang memiliki bioaktivitas
umumnya terdapat sebagai metabolit sekunder seperti alkaloid, flavonoid, terpenoid, steroid
dan lain-lain.

Salah satu tumbuhan yang digunakan sebagai bahan obat tradisional adalah
tumbuhan melur. Melur atau malua (Sumatera Barat) yang dikenal dengan nama latin Brucea
javanica (L) Merr, termasuk jenis tumbuhan semak. Tumbuhan jenis B. Javanica ini
mengandung senyawa kuasinoid yang menunjukkan aktivitas sebagai antimalaria,anti amuba,
dan sitotoksik (antikanker).

Kandungan senyawa kimia pada tanaman B. javanica adalah golongan quasinoid,
triterpenoid ,alkaloida dan steroid.
2,3 Senyawa kimia yang telah diidentifikasi sebanyak 73 senyawa kimia, antara lain javanicolid, javanicosid, yadanziosid, yadanziolid, bruceolid,bruceantinol, brucein, brusatol, bruceacantinoside, bruceosid, dan bruceajavanon A, B, C, A7-asetat serta bruceajavaninon A.

Banyak penelitian telah dilakukan untuk mendapatkan senyawa kimia aktif dari
tumbuhan B. javanica ini. Namun, belum ada ditemukan penelitian yang membahas aktivitas
senyawa alkaloid sebagai anti bakteri dari tumbuhan B. Javanica ini. Untuk itu penelitian ini
dilakukan untuk mengisolasi senyawa alkaloid dari buah B. Javanica yang aktif sebagai anti
bakteri.

  Senyawa yang aktif sebagai anti bakteri dapat ditentukan dengan menghitung daya
hambatnya terhadap pertumbuhan bakteri dalam medium tertentu. Metode yang digunakan
untuk uji aktivitas anti bakteri adalah metode cakram. 
Isolasi senyawa murni dilakukan dengan cara maserasi, fraksinasi dengan berbagai
pelarut, pemisahan komponen dengan kromatografi kolom, dan selanjutnya dilakukan
karakterisasi pada senyawa murni yang didapatkan.

masalahnya adalah : Dari hal ini, diangkat suatu masalah bagaimana cara mengisolasi senyawa
alkaloid dari fraksi aktif ekstrak buah melur (Brucea  javanica (L) Merr) dan bagaimana
aktivitasnya sebagai anti bakteri?

Dr Donald R. Buhler	Antioksidan Kegiatan Flavonoid Departemen Lingkungan dan Toksikologi Molekuler Oregon State University	Dr Cristobal Miranda
Ringkasan: Flavonoid adalah senyawa yang ditemukan dalam buah-buahan, sayuran, dan minuman tertentu yang memiliki efek beragam biokimia dan antioksidan menguntungkan. Asupan makanan mereka cukup tinggi dibandingkan dengan antioksidan diet lainnya seperti vitamin C dan E. Aktivitas antioksidan flavonoid tergantung pada struktur molekul mereka, dan karakteristik struktural dari flavonoid tertentu yang ditemukan dalam hop dan bir menganugerahkan aktivitas antioksidan ampuh melebihi mengejutkan bahwa anggur merah, teh, atau kedelai.   Flavonoid polifenolik senyawa yang mana-mana di alam dan dikategorikan menurut struktur kimia, ke flavonol, flavon, flavanon, isoflavon, catechin, dan anthocyanidins chalcones. Lebih dari 4.000 flavonoid telah diidentifikasi, banyak yang terjadi pada buah-buahan, sayuran dan minuman (teh, kopi, bir, anggur dan minuman buah). Flavonoid telah membangkitkan minat yang cukup baru-baru ini karena efek potensial mereka menguntungkan pada kesehatan manusia-mereka telah dilaporkan memiliki antivirus, anti-alergi, antiplatelet, anti-inflamasi, antitumor dan kegiatan antioksidan. Antioksidan adalah senyawa yang melindungi sel melawan kerusakan akibat spesies oksigen reaktif, seperti oksigen singlet, superoksida, radikal peroksil, radikal hidroksil dan peroxynitrite. Ketidakseimbangan antara antioksidan dan hasil spesies reaktif oksigen dalam stres oksidatif, yang menyebabkan kerusakan sel. Stres oksidatif telah dikaitkan dengan kanker, penuaan, aterosklerosis, cedera iskemik, peradangan dan penyakit neurodegenerative (Parkinson dan Alzheimer). Flavonoid dapat membantu memberikan perlindungan terhadap penyakit ini dengan memberikan kontribusi, bersama dengan vitamin antioksidan dan enzim, untuk sistem pertahanan antioksidan total tubuh manusia. Studi epidemiologis telah menunjukkan bahwa asupan flavonoid yang berbanding terbalik dengan kematian akibat penyakit jantung koroner dan kejadian serangan jantung. The diet diakui antioksidan adalah vitamin C, vitamin E, selenium, dan karotenoid. Namun, studi terbaru menunjukkan bahwa flavonoid yang ditemukan dalam buah-buahan dan sayuran juga dapat bertindak sebagai antioksidan. Seperti alpha-tokoferol (vitamin E), flavonoid mengandung unsur-unsur struktur kimia yang mungkin bertanggung jawab untuk kegiatan antioksidan. Sebuah studi terbaru oleh Dr van Acker dan rekan-rekannya di Belanda menunjukkan bahwa flavonoid dapat menggantikan vitamin E sebagai rantai pemecah anti-oksidan dalam membran hati mikrosomal. Kontribusi flavonoid terhadap sistem pertahanan antioksidan mungkin substansial mengingat bahwa asupan harian total flavonoid dapat berkisar dari 50 sampai 800 mg. Asupan ini tinggi dibandingkan dengan rata-rata harian asupan antioksidan diet lainnya seperti vitamin C (70 mg), vitamin E (7-10 mg) atau karotenoid (2-3 mg). Asupan flavonoid tergantung pada konsumsi buah-buahan, sayuran, dan minuman tertentu, seperti anggur merah, teh, dan bir. Tingginya konsumsi teh dan anggur mungkin yang paling berpengaruh pada asupan flavonoid total kelompok orang tertentu. Oksidasi low-density lipoprotein (LDL) telah diakui untuk memainkan peran penting dalam aterosklerosis. Sel sistem kekebalan yang disebut makrofag mengenali dan menelan LDL teroksidasi, sebuah proses yang mengarah pada pembentukan plak aterosklerotik di dinding arteri. Oksidasi LDL dapat disebabkan oleh makrofag dan juga dapat dikatalisis oleh ion logam seperti tembaga. Beberapa studi telah menunjukkan bahwa flavonoid tertentu dapat melindungi LDL dari yang teroksidasi oleh dua mekanisme. Antioksidan flavonoid (Tercantum dalam urutan penurunan potensi) Quercetin (a flavonol dalam sayuran, kulit buah, bawang) Xanthohumol (a Chalcone terprenilasi di hop dan bir) Isoxanthohumol (a flavanon terprenilasi di hop dan bir) Genistein (isoflavon dalam kedelai) Pro-oksidan flavonoid Chalconaringenin (a Chalcone non-terprenilasi dalam buah jeruk) Naringenin (a flavanon non-terprenilasi dalam buah jeruk) Kapasitas flavonoids bertindak sebagai antioksidan tergantung pada struktur molekul mereka. Posisi kelompok hidroksil dan fitur lainnya dalam struktur kimia flavonoids adalah penting untuk antioksidan dan bebas aktivitas pemulungan radikal. Quercetin, yang flavonol diet yang paling berlimpah, adalah antioksidan kuat karena memiliki semua fitur struktural yang tepat untuk aktivitas radikal bebas. Baru-baru ini, Chalcone dan flavonoid flavanon dengan rantai samping prenyl atau geranyl telah diidentifikasi dalam hops dan bir oleh Dr Fred Stevens dan Dr Max Deinzer di Oregon State University. Hop yang digunakan dalam bir untuk rasa. Xanthohumol (a Chalcone) dan isoxanthohumol dan 6-prenylnaringenin (flavanon) adalah utama prenyl-flavonoids ditemukan dalam bir. Meskipun kegiatan antioksidan dari senyawa ini belum diteliti, flavonoid mungkin bertanggung jawab atas aktivitas antioksidan bir bir, yang lebih tinggi dari teh hijau, anggur merah, atau jus anggur seperti yang dilaporkan sebelumnya oleh Dr Joe Vinson A. dari University of Scranton di Pennsylvania. Xanthohumol hanya ditemukan dalam bir tetapi dalam konsentrasi kecil. Untuk menilai aktivitas antioksidan flavonoid terprenilasi, kami-bekerja sama dengan peneliti LPI-mengevaluasi kapasitas dari flavonoids untuk menghambat oksidasi LDL oleh tembaga. Sifat antioksidan dari prenylflavonoids dibandingkan dengan orang-orang dari quercetin (a flavonol), genistein (isoflavon yang utama dalam kedelai), chalconaringenin (a Chalcone non-terprenilasi), naringenin (a flavanon non-terprenilasi), dan vitamin E. mungkin interaksi xanthohumol, yang prenylchalcone utama dalam bir, dengan vitamin E untuk menghambat oksidasi LDL yang diinduksi oleh tembaga juga diperiksa. Hasil penelitian kami menunjukkan bahwa prenylchalcones dan prenylflavones efektif dalam mencegah oksidasi LDL diprakarsai oleh tembaga dan bahwa prenylchalcones umumnya memiliki aktivitas antioksidan lebih besar daripada prenylflavanones. Xanthohumol, yang prenylchalcone utama dalam hops dan bir, adalah antioksidan lebih kuat daripada vitamin E atau genistein. Namun, xanthohumol adalah kurang kuat dibandingkan quercetin. Potensi xanthohumol sebagai antioksidan yang nyata meningkat bila dikombinasikan dengan jumlah yang setara dengan vitamin E. Seperti dilaporkan dalam Journal of Agricultural and Food Chemistry, kami juga menemukan bahwa kelompok prenyl memainkan peran penting dalam aktivitas antioksidan flavonoid tertentu. Sebuah Chalcone flavonoid (chalconaringenin) dan flavanon (naringenin) tanpa kelompok prenyl bertindak sebagai pro-oksidan, yaitu mereka mempromosikan bukannya membatasi oksidasi LDL oleh tembaga. Namun, menambahkan kelompok prenyl pada molekul-molekul flavonoid menetral pro-oksidan kegiatan mereka. Pekerjaan kami menunjukkan bahwa ada flavonoids yang unik dalam hops dan bir yang mungkin berpotensi berguna dalam penyakit manusia preventionof dikaitkan dengan kerusakan radikal bebas. Pengamatan bahwa kelompok prenyl penting dalam memberikan aktivitas antioksidan dengan flavonoid tertentu dapat menyebabkan penemuan atau sintesis flavonoid terprenilasi novel sebagai agen pencegahan atau terapi terhadap penyakit manusia berhubungan dengan radikal bebas. Hasil yang menggembirakan kami dengan xanthohumol menunjukkan bahwa prenylchalcone ini harus diteliti lebih jauh untuk tindakan antioksidan dan efek protektif terhadap kerusakan radikal bebas pada hewan dan manusia. Studi awal menunjukkan bahwa xanthohumol diserap dari saluran pencernaan pada tikus, dan studi lebih lanjut diperlukan untuk mengevaluasi bioavailabilitas dari flavonoids menarik pada orang. Penelitian lebih lanjut juga diperlukan untuk menentukan keamanan dari flavonoid xanthohumol atau lainnya untuk digunakan sebagai suplemen diet karena dosis tinggi dari senyawa ini dapat menghasilkan efek samping pada manusia, menurut temuan terbaru oleh Dr Martyn Smith, profesor toksikologi, University of California di Berkeley. Untuk informasi tambahan mengenai flavonoid, lihat Linus Pauling Institute Pusat Informasi Micronutrient .   Masalah nya : kenapa dengan menambahkan kelompok prenyl pada molekul-molekul flavonoid dapat menetralkan pro-oksidan kegiatan mereka??